血清的保存應(yīng)該留意以下幾點:
(1)生物學(xué)實驗中需求長時間保存的血清有必要儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超越1個月。因為血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留必定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全凍住的血清。生物學(xué)實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非有必要,一般不主張作此熱處理,因為熱處理會構(gòu)成血清堆積物顯著增多,并且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與反應(yīng)有:細胞毒作用,滑潤肌細胞縮短,肥大細胞和血小板開釋組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
(3)瓶裝血清凍住需采用逐步凍住法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待悉數(shù)溶解后再分裝。生物學(xué)實驗中在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(當(dāng)心勿構(gòu)成氣泡),使溫度與成分均一,減少堆積的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍住,這樣因溫度改動太大,簡略構(gòu)成蛋白質(zhì)凝集而呈現(xiàn)堆積。
(4)一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清參與培養(yǎng)液內(nèi)一同過濾,切勿直接過濾血清。
(5)血清中的堆積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍住后血清中纖維蛋白構(gòu)成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量。可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,堆積物的構(gòu)成會顯著增多。有些堆積物在顯微鏡下調(diào)查象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但假設(shè)懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)當(dāng)即停止使用,替換另一批號的血清。
(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,一同血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量。