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【貴州生物實驗公司】: 大鼠嗅球切除動物模型
發(fā)布時間:07月27日 瀏覽:3946   [ ] 視力保護色:
(1)復制方法

1)手術(shù)方法  雄性大鼠,體重為250~300g,手術(shù)前至少3~4d每日數(shù)次的撫摸。將大鼠分組,以水合氯醛(按350~400mg/kg體重的劑量)或戊巴比妥鈉(按50~60mg/ kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后,剪除頭頸部毛發(fā),皮膚常規(guī)消毒。固定動物在立體定位儀上,兩耳線中點縱向?qū)⑵つw切開,暴露顱骨。在冠狀縫和矢狀縫交點向前7mm、旁開2mm處用牙鉆分別鉆兩個2mm直徑的小孔。用探針向下向前破壞嗅球后用真空泵吸出。用止血海綿填充小孔(或用牙托粉水泥封孔),縫合皮膚,肌肉注射青霉素鈉鹽(每只4萬U連續(xù)注3d)。每組動物按實驗設(shè)計每天分別給予待測藥物或生理鹽水。術(shù)后14d左右即可進行實驗。

實驗前應(yīng)預先解剖1~2只動物觀察并測定鉆孔位置,吸除嗅球時應(yīng)小心不要損傷額葉皮層。實驗結(jié)束后應(yīng)解剖所有去嗅球動物以證實是否完全摘除嗅球。
貴陽生物技術(shù)服務(wù)公司
2)測試方法

①被動回避實驗

跳臺被動回避  電擊箱(30cm×30cm×28cm)底部為金屬柵條可通電,箱內(nèi)有一跳臺(7cm×30cm×4.5cm)。將大鼠先置于電擊箱內(nèi)(不予電擊)使之熟悉環(huán)境1min,然后將大鼠放在平臺上,一旦大鼠觸及金屬柵條就遭遇0.6mA的電刺激,直到大鼠在平臺上連續(xù)呆上3min或遭遇10次電擊為止。記錄至此時大鼠遭電擊的總次數(shù)。大鼠嗅球切除后遭受電擊的次數(shù)明顯增多,反映了嗅球切除可引起被動回避反應(yīng)的欠缺。給予抗抑郁藥后,可減少動物遭電擊的次數(shù)。避暗被動回避實驗箱由明暗兩室組成,兩室底部為不銹鋼柵條,條間距離為1cm。兩室的隔板底部中央有一通道(7cm×7cm)供大鼠出入。暗室的不銹鋼柵條與電刺激儀相聯(lián),如果大鼠進入暗室,則遭遇電擊。將大鼠先放入暗室,并給予一次電擊,大鼠將逃至明室,當大鼠重新進入暗室時,將再次受到電擊,此時記錄為1次,直到大鼠在明室連續(xù)呆上2min遭受電擊達20次,記錄此時大鼠遭受電擊的總次數(shù)。

②主動回避實驗  實驗箱內(nèi)設(shè)有條件刺激裝置,為光刺激(實驗箱兩長側(cè)壁的底部裝有紅外光電管);底部為不銹鋼柵條,與電擊裝置相連,為非條件刺激(電擊刺激)。實驗包括60個試行周期,每個周期分為條件刺激期、非條件刺激期及間歇期。如果大鼠在條件刺激期移動并切斷兩端的光束,則可避免電擊,記錄為“回避反應(yīng)”。如果在非條件刺激期切斷光束,則電擊立即終止,記錄為“逃避反應(yīng)”。如果切斷光束發(fā)生于間歇期,則記錄為“自發(fā)反應(yīng)”。大鼠嗅球切除后,回避反應(yīng)次數(shù)明顯增多,逃避失敗次數(shù)顯著降低,表明嗅球切除后主動回避反應(yīng)能力增強。當給予抗抑郁藥后,主動回避反應(yīng)能力遭破壞。

(2)模型特點與比較醫(yī)學  由于嗅球與邊緣系統(tǒng)功能有關(guān),影響行為、情緒和內(nèi)分泌,因此大鼠切除雙側(cè)嗅球后被動回避學習能力下降、自主活動能力增多、主動回避反應(yīng)能力增強等。這些反應(yīng)部分與嗅球切除后通過改變不同腦區(qū)5-HT能系統(tǒng)功能有關(guān),抗抑郁藥能特異性地逆轉(zhuǎn)這些行為變化。此模型的抑郁效果明顯、可靠性好,且抑郁動物的病理生理學改變與人類抑郁相似,對檢測抗抑郁劑有較高的選擇價值,常用于抗抑郁藥的次篩以及作用機制的研究。其缺點在于對實驗中手術(shù)技術(shù)的要求高和動物的死亡率較高。術(shù)前術(shù)后的每日

撫摸對于減少術(shù)后動物的易怒性及測試時的行為差異很重要。
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